Podczas obchodzenia się z mikroorganizmami ważne jest, aby prawidłowo stosować technikę aseptyczną - zarówno po to, aby zapobiec zanieczyszczeniu mikroorganizmów przez siły zewnętrzne, jak i chronić siebie i ludzi wokół ciebie.
Kroki
Krok 1. Chroń się
Zwiąż długie włosy i załóż fartuch laboratoryjny i okulary ochronne.
Krok 2. Umyj ręce i miejsce pracy
Umyj ręce wodą z mydłem i spryskaj ławkę 70% etanolem.
Krok 3. Rozłóż cały swój sprzęt
Upewnij się, że masz wszystko gotowe przed rozpoczęciem.
Krok 4. Włącz palnik Bunsena tak wysoko, jak to możliwe
Będziesz go potrzebować do sterylizacji sprzętu, a przeciąg w górę zapobiega przedostawaniu się zanieczyszczeń z zewnątrz na twoją kulturę.
Obróć kołnierz tak, aby przepływ powietrza był całkowicie otwarty
Krok 5. Wysterylizuj ezę do zaszczepiania
Trzymaj go pod kątem około 45° w dół i powoli przesuwaj przez płomień, aby świecił czerwono-biało na gorąco.
- Najłatwiej jest trzymać pętlę między kciukiem a palcem wskazującym i podpierać ją środkowym palcem.
- Najgorętsza część płomienia znajduje się na samym końcu wewnętrznego, niebieskiego stożka ognia.
Krok 6. Drugą ręką chwyć swoją oryginalną kulturę
- Jeśli jest to talerz, przytrzymaj go i obróć pokrywkę na tyle, aby pętla znalazła się w środku.
- Jeśli jest to probówka z pokrywką, użyj małego palca ręki, którą trzymasz ezę do zaszczepiania, aby zdjąć pokrywkę, a następnie szybko dwukrotnie przeciągnij otwór probówki przez płomień palnika Bunsena. Nazywa się to płomieniami i zabija wszystko, co chce dostać się do rurki, i tworzy prąd konwekcyjny, który wypycha powietrze z rurki, więc nic nie może go dostać. Trzymaj pokrywkę małym małym palcem w następnym kroku.
Krok 7. Zaszczepić
Dotknij ezą do zaszczepiania kolonii, którą chcesz zebrać. Jeśli zaszczepiasz z płynnego bulionu, zanurz ezę w probówce i potrząśnij ezą, aby upewnić się, że masz wystarczającą ilość bakterii.
Krok 8. Zamknij oryginalną kulturę
Jeśli to talerz, po prostu zamknij pokrywkę i odłóż ją z powrotem. Jeśli to rurka, dwukrotnie przeciągnij otwór przez płomień palnika Bunsena, a następnie załóż z powrotem pokrywkę.
Krok 9. Otwórz nową płytkę
Tak jak poprzednio, wolną ręką odkręć pokrywę na tyle szeroko, aby wsunąć pętlę
Krok 10. Połóż bakterie na płytce
Lekko przeciągnij ezę po powierzchni, uważając, aby nie przebić agaru.
Powszechnym wzorem smug jest metoda kwadrantowa
Krok 11. Zamknij płytkę
Krok 12. Wysterylizuj ezę do zaszczepiania
Tak jak poprzednio, trzymaj go pod kątem 45° w dół i powoli przesuwaj przez płomień, aby stał się czerwono-biały gorący.
Porady
- Generalnie rękawiczki nie są potrzebne. Wszystkie powyższe kroki służą ochronie zarówno Ciebie, jak i Twoich bakterii, więc ryzyko zanieczyszczenia jest bardzo niskie. Rękawiczki mogą powodować nieprzyjemne oparzenia, jeśli przypadkowo dotkniesz ich gorącą ezą do zaszczepiania.
- Pamiętaj, że pracujesz z ogniem. To nic wielkiego, tylko upewnij się, że wiesz, co zrobić, jeśli się poparzysz; przerwij eksperyment, opłucz oparzenie wodą i, jeśli to konieczne, powiadom swojego przełożonego.
- Jeśli wykonujesz wiele cykli, używając techniki aseptycznej, nie jest konieczne całkowite wyłączanie palnika Bunsena między cyklami – po prostu ustaw go na płomień pilotujący i wyłącz go do końca, gdy skończysz.
